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抗精子抗体的检查项目

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  抗精子抗体的检查项目?对于抗精子抗体的检查是很繁琐的一个环节,让很多患者感到头疼。西安生殖保健院医生给大家介绍一下抗精子抗体检查项目。

  >>>抗精子抗体的检查项目

  1、反应板包被抗原:将人精子抗原稀释成 3.5~ 5μg/mL,包被液加到聚氯乙烯微量测定板内,每孔 100μL,置 4℃ 冰箱过夜。

  2、精子抗原制备:筛选收集精液常规检查正常的精液,用生理盐水反复离心洗涤,尽可能除去精浆,经超声波超声粉碎,10~ 15min 高速离心,吸上清,测定上清液蛋白浓度,将蛋白浓度稀释为 3.5~ 5.0μg/mL,为精子抗原溶液。

  3、封闭处理:次日早晨,倾去抗原溶液,用洗涤 PBS洗 3次,每次 5min,每次洗涤后都要将板在纸上拍干,再加入 1% 的聚乙烯醇溶液 200μL封闭,置室温 1h后同上法洗涤。 

  4、加待测样品:样品用 PBS稀释 100倍,每孔加入 100μL,同时加 As-Ab血清及正常处女血清作分别阳性和阴性对照,置 37℃ 温育 1h,同上法洗涤。

  5、加酶结合物:HRP-Protein A 以 1∶640稀释,每孔加入 100μL,置室温 1h,同上洗涤。

  6、结果判定:用酶标测定仪 490μm测其 OD 值,OD 值≥2.0时为阳性。 

  7、酶反应:加新鲜配制的 OPD 底物溶液,每孔加入 50μL,置室温暗处 10min,再加10% H2SO4终止液每孔 50μL。

  西安生殖保健院医生提示,除了需要到正规的医院进行检查和治疗外,还应该养成良好的卫生习惯,这样就可以避免后患的发生。

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